操作時應注意配制標樣的濃度要接近被測樣品的
2.2.3 標準加入法
標準加入法是工作曲線的一種特殊應用。
選擇適當?shù)娘@色條件,先測定濃度為cx的未知樣品吸光度為Ax,再向未知樣品中加入一定量的標樣,配置成濃度為cx+Δc1、cx+Δc2……一系列樣品,分別顯色后再測定吸光度為A1、A2……在坐標紙上繪圖,以吸光度A為縱坐標,以濃度c為橫坐標,分別畫出Δc1、Δc2所對應的A1、A2等各點,連成直線后延長,與橫軸的交點cx也就是未知樣品的濃度cs。
應用標準加入法時要注意,加入的標樣濃度要適當,使畫出的曲線保持適當角度,濃度過大或過小都會帶來測量誤差。
這種方法操作比較麻煩,不適于作系列樣品分析,但它適用于組成比較復雜,干擾因素較多>又不太清楚的樣品,因為它能消除背景的影響。
2.3 紫外可見分光光度計使用中的注意點
2.3.1 保護光源
光源燈有一定的壽命,儀器不工作時不要開燈,若工作間歇時間短,可不關燈。
一旦停>,則要待燈冷卻后再重新啟動,并預熱15min。
燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時,就及時更換。
經(jīng)經(jīng)紫外光照射后形成結痕可用無水乙醇去除。
2.3.2 保證合適的工作環(huán)境
溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
不適宜的溫度和濕度可引起機械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機械部分的誤差或性能下降;
造成光柵、反射鏡、聚焦鏡等光學部件的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等;
甚至使儀器停止工作,從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正溫度和濕度。
實驗室,特別是地處南方地區(qū)的實驗室,應具備四季恒溫的儀器室,配備恒溫設備。
環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也可以影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電耦合器的可靠性,也是造成光學部件鋁膜銹蝕的原因之一。
因此定期清潔,保障環(huán)境和儀器內衛(wèi)生條件,防塵。
2.3.3 定期除塵、調校
2.3.4 正確使用比色皿
拿比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
清洗比色皿時,先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。若被比色皿被有機物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。每次做完實驗應立即洗凈比色皿。
比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干,以保護透光面。
測定有色溶液吸光度時,一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減少測量誤差。
若分光光度計噪音比較大,有可能是光源燈泡使用時間超過壽命期,可更換光源燈泡。
若自檢時提示波長自檢出錯,有可能是自檢過程中打開過儀器樣品室的蓋子,