式中ε是吸光物質(zhì)在特定波長(zhǎng)和溶劑的情況下的一個(gè)特征常數(shù)，數(shù)值上等于濃度為1mol/L的吸光物質(zhì)在1cm光程中的吸光度。
由實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算ε時(shí)，常以被測(cè)物質(zhì)的總濃度代替吸光物質(zhì)的濃度，實(shí)際上時(shí)表觀摩爾吸光系數(shù)。
在多組分體系中，如果各種吸光物質(zhì)之間沒(méi)有相互作用，體系的總吸光度等
透光度T是透射光強(qiáng)度I與入射光強(qiáng)度I0之比，即：
T=I/I0
因此：A=lg(1/T)
二、主要部件
盡管光度計(jì)種類型號(hào)繁多，但它們都是由相同的基本部件組成的，包括光源、單色器、吸收池和檢測(cè)系統(tǒng)。
2.1 光源
在測(cè)量吸光度時(shí)，要求光源發(fā)出所需波長(zhǎng)范圍內(nèi)的連續(xù)光譜，要具有足夠的光強(qiáng)度，并在一定時(shí)間內(nèi)能保持穩(wěn)定。在可見(jiàn)光區(qū)測(cè)量時(shí)，背Ｊ褂夢(mèng)偎康譜魑庠礎(chǔ)Ｎ偎考尤鵲槳壯闋刺被岱⒊霾ǔぴ?20~2500nm之間的連續(xù)光譜。
鎢絲燈工作溫度一般為2600~2870K，熔點(diǎn)為3680K。鎢絲燈的溫度決定于電源電壓，電源電壓的微小波動(dòng)會(huì)引起鎢燈光強(qiáng)度的很大變化，因此使用穩(wěn)壓電源。
在紫外區(qū)測(cè)量時(shí)，常采用氫燈或氘燈產(chǎn)生波長(zhǎng)在180~375nm之間的連續(xù)光譜作為光源。
其理想光源應(yīng)具有覆蓋整個(gè)紫外可見(jiàn)光區(qū)的連續(xù)輻射，強(qiáng)度應(yīng)比較高，且隨波長(zhǎng)變化能量變化不大，但在實(shí)際上難以實(shí)現(xiàn)。
氘燈輻射強(qiáng)度比氫燈高2~3倍，壽命也比較長(zhǎng)。氙燈的強(qiáng)度一般高于氫燈，但欠穩(wěn)定，波長(zhǎng)范圍180~1000nm，常用作熒光分光光度計(jì)的激發(fā)光源。
2.2 單色器
單色器是將光源發(fā)射的復(fù)合光分解為單色光的裝置。
一般由5部分組成：入光狹縫、準(zhǔn)光氣（一般由透鏡或凹面反光鏡使入射光成為平行光束）、色散器、投影器（一般由一個(gè)透鏡或凹面鏡將分光后的單色光投影至出光狹縫）、出光狹縫。
色散器是單色器的核心部分，常用的色散元件是棱鏡或光柵。
棱鏡由玻璃或石英制成，玻璃棱鏡色散能力強(qiáng)，但吸收紫外光，只能用于350-820nm波長(zhǎng)的分析測(cè)定，在紫外區(qū)用石英棱鏡。
光柵的特點(diǎn)是：色散均勻，呈線性，光度測(cè)量便于自動(dòng)化，工作波段廣。
2.3 吸收池
也稱為比色皿，是盛放樣品溶液的容器，具有兩個(gè)互相平行、透光且具有厚度的平面。玻璃吸收池光程長(zhǎng)度一般為1cm，也有0.1-10cm的。
由于吸收池厚度存在一定誤差，其材質(zhì)對(duì)光不是完全透明，在做定量分析時(shí)，對(duì)吸收池應(yīng)做配套性試驗(yàn)，試驗(yàn)后標(biāo)記出放置方向。紫外光區(qū)數(shù)值不跳為石英。
2.4檢測(cè)系統(tǒng)
檢測(cè)系統(tǒng)包括檢測(cè)器和記錄顯示裝置。檢測(cè)器是一種光電轉(zhuǎn)換設(shè)備，將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)顯示出來(lái)。常用的檢測(cè)器有光電池、光電倍增管和光二極管陣列檢測(cè)器等。
光電池的光電流較大，不用放大，用于初級(jí)的
分光光度計(jì)上，疲勞效應(yīng)嚴(yán)重。
光電倍增管利用二次電子發(fā)射來(lái)
光二極管陣列檢測(cè)器由于全部波長(zhǎng)同時(shí)被檢測(cè)，掃描速度快，可在0.1s內(nèi)完成對(duì)190-800nm波長(zhǎng)范圍的掃描。
記錄顯示裝置包括放大器和結(jié)果顯示裝置。70年代采用數(shù)字讀出裝置。
