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疫苗的微觀形態
電子探針,顧名思義,是利用一束壓縮的細的高能電子束,在樣品上激發出二次電子、背散射電子及特征X射線等各種物理信號,進而實現納米尺度的微觀形態觀察以及任意指定位置的微區成分分析。
接下來就讓島津的電子探針顯微分析儀帶我們開啟一趟疫苗微觀世界的奇妙之旅吧。
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疫苗的微觀形態
以百白破疫苗為例,用移液槍吸取少量百白破疫苗,滴至粘有導電膠帶的鋁制樣品座上,自然風干后噴鍍碳膜,上機測試。利用二次電子像在較低放大倍數下(600x)觀察疫苗微觀形態,如圖2所示,可見疫苗顆粒呈明顯的團簇狀。
對圖2黃色方框標示位置在更大倍數(3000x)進一步觀察疫苗顆粒的微觀細節,結果如圖3所示;顆粒清晰可見,在大塊狀顆粒(紅色線條內)周圍包裹有大量絮狀物。對圖3大塊狀顆粒(紅色線條內)進行微區成分定性分析,定性譜圖如圖4所示。
圖4 疫苗樣品大塊狀顆粒微區成分定性分析結果
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微區成分定性分析結果
由圖4定性譜圖可知,大塊狀顆粒物主量元素為O、Al,表明該大塊狀顆粒應為百白破疫苗的重要組分之一——鋁佐劑,而其周邊包裹的大量絮狀物應為抗原及其它結晶物;鋁佐劑對抗原的吸附和解吸附能力直接關系到疫苗的有效性和,就該疫苗而言,其所用鋁佐劑的吸附作用較強,導致佐劑顆粒聚集成團,進而表現為圖2中的大團絮狀。
此外,微區成分定性結果中存在微量的P、Cl、Na、K元素,推測來自PBS緩沖液。PBS緩沖液是液體疫苗的重要組成部分,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,具有維持pH值和佐劑組成、zeta電勢等功能。從工藝過程推測,微量的Mg、Ca元素也來自緩沖液,作用是提供雙價陽離子;微量的Si元素,可能來自鋁佐劑的制備過程;微量的S元素可能來自蛋白質和疫苗生產工藝中硫酸銨沉淀環節。
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